· poliakrylamidGel akrilamid monomer, polimerləşmə, katalizatoru, katalizatoru və duz və tampon qarışığının sağını birlikdə olmalıdır.
· akrilamidvə bis (n, n '- metilen ikiqat akrilamid) monomer forma jel matrixidir.
· Ammonium, başlanğıc yapışan polimerləşmə prosesini personfat. Yapışqanın formalaşdırılması suda hazırlanmış 10% ammonium persulfat həllini tələb edir. Məlumatların əksəriyyəti aktiv istifadəyə ehtiyac olduğunu bildirdi. Bununla birlikdə, 10% həll bir neçə həftə ərzində bir neçə həftə ərzində əhəmiyyətli bir fəaliyyət itkisi olmadan yerləşdirilə bilər. 10 ml-ə qədər edin və yapışqan məcmu olmadıqda atın.
İpucu: faiziakrilamidArdıcıl yapışqan və protein yapışqanında eyni deyil. Əvvəlcədən acrylamide istifadə edərsə: BIS həlli, sağ şüşəni əldə etdiyinizə əmin olun.
· TEMED (n, n, n, n ', n' - tetrametil etilendiamin), soyuducuya yerləşdirilən qəhvəyi bir şüşədə bir katalizatordur. Yapışqan tökmədən əvvəl əlavə edin.
Elektroforezdə istifadə olunan şüşə poliakrylamid elektroforez hər dəfə əvvəl və sonra yuyulmalıdır. Elektroforezdən sonra yumşaq bir fırça və isti sabunlu suda parça ilə yuyun, distillə edilmiş su ilə yuyun və qurudun.
· Nəm və toz içi boş polimerlə səbəb ola bilər. Elektroforezdən əvvəl şüşə təmizləyici ilə şüşə boşqab təmizləyin və yumşaq bir fırça ilə silin. Distillə edilmiş su ilə yuyun və bir kağız silməklə hərtərəfli qurudun. Kağızla silməkdən əvvəl 70% etanol ilə durulama qurutma və sürətlənməyə kömək edir. Acrylamide nümunələrini ardıcıl olaraq əlavə edin: BIS, Su, Bufer Həll, Ammonium Persulfat, TEMED. Yaxşı silkələyin və dərhal tökün.
Polimerləşmə qarşısında polikerlilamidin deqilyasidini degalamaq lazım deyil. (Akrylamid, oksigen polimerləşməni inhibə etdiyinə görə baloncukları çıxarmaq üçün bir vakuumda yerləşdirilirdi.)
Üfüqi yapışqan nöqtə nümunəsi tövsiyələri.
· Daha aydın görmək üçün bir neçə nümunə çuxuru etmək üçün qara bir kağız, qara fonda qara bir kağız qoyun.
· Yapışqan tank doldurulmuş tampon, yalnız kolloid üzərində.
· Edge bir işığı varsa, işıqları yandırın, işıq kolloid parıldayın. Nümunəni pipetə çəkin.
· Avtomatik pipet cihazından istifadə.
· 10-200 MU 1-də 1 maye hərəkətli nöqtə nümunə nöqtələrinin əksəriyyətində istifadə edilə bilər. Çox kiçik nümunə deşikləri üçün (10 m-dən az), ardıcıllıqla yapışqan üçün istifadə olunan uzun pipet başçısı daha əlverişlidir.
· Pipetting yalnız yavaş-yavaş hərəkət edən maye nəfəs alaraq nümunəyə batırılır. Nümunə qliserin ilə yapışqan görünə bilər və sürətli nasoslar hava baloncuklarını pipet başına çəkə bilər.
· Pipetting başını inhalyasiya etdikdən sonra nümunələr, maye başını borunun kənarına və ya silmək üçün kağızın kənarındakı maye başı silmək üçün silməklə maye başını yumşaq bir şəkildə hərəkət etdirəcəkdir. Nümunəni əmmək üçün ehtiyatlı olun.
Nümunəni nümunə çuxuruna qoyun
· Bir az təzyiq saxlamaq üçün boru kəməri cihazı, nümunələri biraz aşırı maye başını biraz hərəkət etdirin.
The Buferə daxil edilmiş pipet başlığı, spot deliklərindən bir qədər yüksəkdir, müsbət təzyiqi qoruyun. Pipetin ucu kiçik bir çuxura daxil edilə bilər.
· Nümunələr yavaş-yavaş və durmadan. Pipet ucu nöqtə nümunəsinin üstündə yerləşdirilir və nümunə çuxura batacaqdır. Nümunə çuxurunu itələmək əvəzinə doldurmaq üçün nümunə batdı.
Maye başı olan nümunənin son damlası bir dəfə, maye ikinci ayağa keçəcək, yavaş-yavaş maye hərəkətini qaldır, tampondan çıxın
Şaquli yapışqan nümunəsi necə etmək olar?
· İki şüşə şüşə arasında meydana gələn şaquli yapışqan nöqtə nümunəsi dəlikləri. Çox nazik yapışqanda, pipet başçısı hətta iki şüşə plitə arasında da daxil edilə bilməz. Gliserin izləyin! Pipetin başını nümunə çuxuruna qoyun və nümunə çuxura batacaq.
· Əvvəlki nöqtə nümunəsi, polipropilen acil gel nümunə çuxurunun şaquli nöqtəsini qoymağınızdan əmin olun. Vahidsiz akrylamidini və nümunə çuxurunun altındakı görünə biləcək suyu yuyun. Su nümunə çuxurunu əhəmiyyətli dərəcədə kiçik edə bilər. 25ml və ya 50ml şpris və 18 ölçülü bir iynə istifadə edin. Elektroforez buferinə tökün və nümunə çuxurunu diqqətlə vurun.
The Nümunə çuxurunu görmək çətin ola bilər, eyni zamanda qalanları asandır. Artıq boşluq varsa, nümunə tamponu bromofenol mavi ilə sınaqdan keçirilə bilər.
Time vaxt: 31-2023